Search results

1

Aspiryna – 115 lat po odkryciu

100%

Smolik S., Węglarz L.

Annales Academiae Medicae Silesiensis

|

2013

|

vol. 67

|

issue 1

67-73

EN

Aspirin has been known as a commercial drug for over a century, however, a much deeper understanding of its mechanism of action as an inhibitor of cyclooxygenase (COX) activity and thus, of prostanoid synthesis, is still lacking. Recent advances in understanding the central role of platelets in the pathophysiology of cardiovascular diseases and the identification of novel lipid mediators synthesized in the presence of aspirin have increased research upon the mechanisms of aspirin action.

PL

Aspiryna jest lekiem dostępnym komercyjnie od ponad stu lat, chociaż wciąż brakuje głębszego zrozumienia mechanizmu jej działania jako inhibitora aktywności cyklooksygenazy i syntezy prostanoidów. Niedawne odkrycia dotyczące centralnej roli płytek krwi w patofizjologii chorób układu sercowo-naczyniowego oraz identyfikacja nowych mediatorów lipidowych syntetyzowanych w obecności aspiryny nasiliły badania nad mechanizmami działania aspiryny.

2

Molekularne metody stosowane w diagnostyce zespołu long-QT

81%

Moric-Janiszewska E., Głowacka M., Węglarz L.

Annales Academiae Medicae Silesiensis

|

2012

|

vol. 66

|

issue 4

41-47

EN

LQTS (long QT syndrome) is a genetic disorder caused by the mutations of genes adversely aff ecting the ion channel function in the cellular membranes of cardiac myocytes. Prolonged repolarization detected on a ECG as a longer QT interval (> 450 ms) is responsible for syncope, cardiac arrest and sudden cardiac death (SCD), due to transient “torsade de pointes” (TdP) or ventricular fibrillation. Currently, 12 types of long-QT syndrome have been identifi ed, which are caused by 600 mutations of genes located on chromosomes: 3,4,6,7,11,17,21. Depending on the particular gene mutation in the LQT syndrome, subtypes from LQTS1 to LQTS12 were identifi ed. The knowledge of genetic disorders in diff erent types of LQTS has enabled the introduction of genotype-dependent therapy. Due to the frequent absence of clinical signs in 40% of mutant genes carriers, it is very important to develop fast and eff ective diagnostics. These patients do not always suit the clinical diagnostic criteria and therefore they should be diagnosed using molecular methods. In the present study we describe some molecular methods (SSCP, sequencing, quantitative PCR) most commonly used in genetic diagnostics of the long-QT syndrome.

PL

LQTS (long-QT syndrome) oznacza wrodzony zespół wydłużonego odcinka QT i jest chorobą kanałów jonowych uwarunkowaną genetycznie. U jej podstaw leżą mutacje genów kodujących białka i podjednostki kanałów jonowych błony podstawnej kardiomiocytów, istotne dla prawidłowego ich funkcjonowania. Jej głównymi cechami są: wydłużenie odstępu QT (> 450 ms) widoczne w obrazie EKG, pojawianie się omdleń, zatrzymania akcji serca oraz nagła śmierć sercowa SCD (sudden cardiac death), spowodowana występowaniem wielokształtnego częstoskurczu komorowego typu torsade de pointes (TdP) lub też migotaniem komór. Obecnie zidentyfi kowano 12 odmian zespołu long-QT, które spowodowane są aż 600 mutacjami genów zlokalizowanych w chromosomach: 3, 4, 6, 7, 11, 17, 21. Zależnie od mutacji konkretnego genu, w zespole LQT wyodrębniono podtypy od LQTS1 do LQTS12. Poznanie zaburzeń genetycznych w poszczególnych typach LQTS umożliwiło wprowadzenie terapii zależnej od genotypu. Ze względu na częste niewystępowanie objawów klinicznych aż u 40% nosicieli zmutowanych genów bardzo ważna jest szybka i skuteczna diagnostyka. U pacjentów takich nie zawsze sprawdzają się kliniczne kryteria diagnostyczne i dlatego należy ich diagnozować metodami molekularnymi. W przedstawionej pracy opisano niektóre (SSCP, sekwencjonowanie, ilościowy PCR) najczęściej stosowane, molekularne metody diagnostyki zespołu long-QT.

3

Ocena sekrecji IL-6 przez komórki nowotworowe jelita grubego traktowane kwasem fitynowym

81%

Parfiniewicz B., Węglarz L., Hollek A.

Annales Academiae Medicae Silesiensis

|

2009

|

vol. 63

|

issue 6

23-31

EN

BACKGROUND Series of evidences have shown that interleukin-6 (IL-6) could play an important role in the pathogenesis of colon cancer. Inositol hexaphosphate (IP6) is a naturally occurring polyphosphorylated carbohydrate, found in many plant sources and in certain high-fi ber diets. Over the past few years interest in IP6 has stemmed mostly from its potentially important antineoplastic activity against various types of cancer, including colon cancer. Moreover, it was pointed out that IP6 has ability to act on the host immune functions and infl ammatory processes by controlling the synthesis of cytokines such as IL-6. The aim of this study was to evaluate the infl uence of IP6 on IL-6 secretion by malignant epithelial colorectal Caco-2 cells. MATERIAL AND METHODS The Caco-2 cells were treated with IP6 at the concentrations of 1.0; 2.5; 5.0 mM for 1; 6; 12 and 24 hours. The level of IL-6 was measured by enzyme-linked immunosorbent assay. The concentration of IL-6 was related to the amount of total cell protein which was estimated by the Bradford method (pg/mg). RESULTS It was found that colorectal Caco-2 cells constitutively secreted IL-6 at the constant level during 24 hour culture. IP6 down-regulated IL-6 secretion in a dose and time dependent manner. Conclusion old The present fi ndings demonstrate that IP6 in the lumen of the large intestine may play an immunoregulatory role by inducing changes in IL-6 secretion by epithelial colon cells.

PL

WSTĘP Szereg danych wskazuje, że interleukina-6 (IL-6) może odgrywać potencjalną rolę w patogenezie raka jelita grubego. W ciągu ostatnich lat szczególną uwagę naukowców zwraca aktywność przeciwnowotworowa kwasu fi tynowego (IP6), ufosforylowanego węglowodanu, składnika diety bogatobłonnikowej. Pojawiły się sugestie, że może on modulować przebieg reakcji odpornościowych i stanów zapalnych między innymi poprzez regulację syntezy cytokin takich jak IL-6. Celem pracy była ocena wpływu IP6 na sekrecję IL-6 przez komórki nowotworowe jelita grubego linii Caco-2. MATERIAŁ I METODY Komórki linii Caco-2 eksponowano na działanie IP6 w stężeniach 1,0; 2,5; 5,0 mM przez 1; 6; 12 i 24 godziny. Oznaczenie stężenia IL-6 w hodowlach przeprowadzono przy użyciu testu ELISA, natomiast do oznaczenia stężenia białka zastosowano metodę Bradforda. Stężenie IL-6 wyrażono w pg/mg białka komórek. WYNIKI Stwierdzono, że transformowane komórki nabłonkowe jelita grubego linii Caco-2 wykazują konstytutywną sekrecję IL-6, utrzymującą się na stałym poziomie w czasie trwania doświadczenia. IP6 posiada zdolność do zmniejszania tej sekrecji w sposób zależny od jego stężenia i czasu działania na komórki. WNIOSKI Wyniki badań sugerują, że IP6 obecny w świetle jelita może wywierać efekty immunoregulatorowe związane ze zmianami sekrecji IL-6 w komórkach nabłonka jelitowego.

4

Polimorfi zm genetyczny wybranych alleli cytochromu CYP2D6 u pacjentów z kardiomiopatią rozstrzeniową i zapaleniem mięśnia sercowego

81%

Smolik S., Domal-Kwiatkowska D., Węglarz L.

|

EN

Cytochrome P450 2D6 has been reported to possess variation in the encoding gene that aff ects enzymatic activity. Interindividual diff erences in CYP2D6 activity can produce adverse eff ects or lack of therapeutic eff ect under standard therapy. The aim of the study was to genotyope the chosen alleles of CYP2D6 among the patients with clinically confi rmed myocarditis or dilated cardiomyopathy. Tetra-primer PCR assays was used to detect mutations in CYP2D6 *3, *4 and *6 allelles among 53 patients. A multiplex long PCR was used to genotype CYP2D6*5 allele. Analysis showed the presence of one heterozygote for CYP2D6*3, two heterozygote for CYP2D6*6, ten heterozygote and two homozygote for CYP2D6*4 among the examined patients. One person with deletion of CYP2D6 locus was also detected. Presented methods will facilitate and accelerate the detailed pharmacogenomic analysis of CYP2D6.

PL

Cytochrom CYP2D6 ma różne warianty sekwencji kodującego go genu, wpływające na jego aktywność enzymatyczną. Międzyosobnicze różnice w aktywności izoenzymu CYP2D6 mogą prowadzić do działań niepożądanych lub braku skuteczności terapeutycznej standardowych dawek leku. Celem pracy było genotypowanie wybranych alleli CYP2D6 w grupie pacjentów z potwierdzonym klinicznie stanem zapalnym mięśnia sercowego lub kardiomiopatią rozstrzeniową. W pracy zastosowano reakcję PCR z użyciem czterech starterów w celu detekcji alleli 3*,4* i 6* CYP2D6 w grupie 53 pacjentów. Do wykrycia allelu CY2D6*5 zastosowano długołańcuchową reakcję PCR typu multipleks. Przeprowadzona analiza wykazała w badanej grupie pacjentów obecność jednej heterozygoty dla allelu CYP2D6*3, dwóch heterozygot dla allelu CYP2D*6, dziesięciu heterozygot i dwóch homozygot dla alellu CYP2D6*4. Znaleziono także jedną osobę z delecją locus CYP2D6. Przedstawione metody ułatwiają i przyspieszają dokładną analizę farmakogenetyczną izoformy CYP2D6.

5

Ochronny wpływ kwasu fitynowego na peroksydację kwasu linolowego w warunkach in vitro

71%

Zajdel A., Parfiniewicz B., Wilczok A., Węglarz L., Dzierżewicz Z.

Annales Academiae Medicae Silesiensis

|

2009

|

vol. 63

|

issue 4

7-16

EN

BACKGROUND Free radical processes are known to induce oxidative damage in biomolecules and thus, play an important role in the etiology of a number of diseases including cancer. Phytic acid (myo-inositol hexaphosphate, IP6) is a naturally occurring carbohydrate widely found in fi ber-rich foods and also contained in almost all mammalian cells. This compound demonstrates various biological activities. The aim of this study was to clarify whether phytic acid possesses the ability to inhibit autooxidation and Fe(II)/ascorbate-induced peroxidation of linoleic acid, to scavenge of hydrogen peroxide, and chelate ferrous ions. MATERIAL AND METHODS The antioxidant properties of the IP6 at various concentrations (1-500 μM) have been evaluated by using the assays based on hydrogen peroxide scavenging and ferrous metal ions chelating activity determination. The eff ect of IP6 (1-500 μM) on autooxidation and Fe(II)/ascorbate-induced lipid peroxidation in micelles of linoleic acid after 24 h incubation was investigated using a reverse-phase high-performance liquid chromatography (RP-HPLC) with UV detection. RESULTS The Fe(II) chelating eff ects of IP6 were concentration-dependent. IP6 exhibited 11,9%, 58,6%, 69,3%, 87,1% of ferrous ions chelation at 10 μM, 50 μM, 100 μM, 500 μ􀈂 , respectively. IP6 at 100 μM and 500 μM eff ectively inhibited the disappearance of linoleic acid, both in the absence and the presence of Fe(II)/ascorbate. The inhibitory eff ect of IP6 on Fe(II)/ascorbate-induced lipid peroxidation was lower due to its direct interaction with Fe(II) ions. In the absence of Fe(II)/ascorbate, IP6 at 100 μM and 500 μM signifi cantly suppressed decomposition of linoleic acid hydroperoxides. It was incapable of scavenging of hydrogen peroxide. Conclusions: IP6 can act as a natural antioxidant in vitro. The obtained results suggest that it can play an important role in modulating lipid hydroperoxide level in biological systems.

PL

WSTĘP Procesy wolnorodnikowe, prowadzące do oksydacyjnych uszkodzeń biomolekuł, pełnią ważną rolę w etiologii licznych schorzeń, włączając choroby nowotworowe. Kwas fi tynowy (sześciofosforan mio-inozytolu, IP6) jest naturalnie rozpowszechnionym węglowodanem występującym obfi cie w diecie o dużej zawartości włókna pokarmowego, jak również obecnym w prawie wszystkich komórkach ssaków. Związek ten wykazuje szerokie spektrum działania biologicznego. Celem pracy było zbadanie, czy kwas fi tynowy posiada zdolność do hamowania autooksydacji i peroksydacji kwasu linolowego indukowanej jonami Fe(II) w obecności kwasu askorbinowego oraz czy jest zdolny do unieszkodliwiania nadtlenku wodoru i chelatowania jonów Fe(II). MATERIAŁ I METODY Do zbadania antyoksydacyjnych właściwości IP6 w wybranych stężeniach (1-500 μM) zastosowano metody pozwalające ocenić stopień zmiatania nadtlenku wodoru oraz aktywność chelatującą jony Fe(II). Wpływ IP6 (1-500 μM) na autooksydację oraz indukowaną jonami Fe(II) w obecności kwasu askorbinowego peroksydację w micelach kwasu linolowego po 24 godzinach inkubacji określano stosując wysokosprawną chromatografi ę cieczową w odwróconym układzie faz (RP-HPLC) i detekcję UV. WYNIKI IP6 w sposób zależny od stężenia chelatował jony Fe(II). Procent schelatowanych jonów Fe(II) wynosił 11,9%, 58,6%, 69,3%, 87,1% odpowiednio dla stężeń IP6 10 μM, 50 μM, 100 μM, 500 μM. IP6 w stężeniach 100 μM i 500 μM znacząco hamował zanik kwasu linolowego zarówno w nieobecności i obecności układu redoks Fe(II)/kwas askorbinowy. Hamujący wpływ IP6 na indukowaną przez Fe(II)/kwas askorbinowy peroksydację był mniejszy, ze względu na bezpośrednią interakcję IP6 z Fe(II). W nieobecności układu redoks Fe(II)/kwas askorbinowy, IP6 w stężeniach 100 μM i 500 μM, znacznie hamował rozpad wodoronadtlenków kwasu linolowego. IP6 nie był zdolny do zmiatania nadtlenku wodoru. Wnioski: IP6 może działać jako naturalny antyoksydant w warunkach in vitro. Wyniki badań sugerują, że może on pełnić istotną rolę w modulowaniu poziomu wodoronadtlenków lipidowych w układach biologicznych.

6

Wykorzystywanie ustrojowych źródeł żelaza przez bakterie Desulfovibrio desulfuricans

71%

Jaworska-Kik M., Lodowska J., Wolny D., Dzierżewicz Z., Węglarz L.

Annales Academiae Medicae Silesiensis

|

2011

|

vol. 65

|

issue 3

21-27

EN

Pathogenicity of Gram-negative bacteria is determined by their ability of iron uptake from environmental and human reserve sources. To acquire this element microorganisms synthesize siderophores, iron chelating structures that allow them to utilize various host iron sources such as hemoglobin, myoglobin, ferritin, transferrin and lactoferrin. Host iron sources utilized by Desulfovibrio desulfuricans (D. desulfuricans) are still unrecognized. These microorganisms colonize a human alimentary tract as a component of the natural intestinal microfl ora. However, their involvement in the pathogenesis of intestinal disorders, such as Crohn’s disease or ulcerative colitis, cannot be excluded. The purpose of this study was to analyze the ability of these bacteria to utilize several body iron sources. The aim of the study was realized by the evaluation of number of colonies of pre-starved D. desulfuricans strains after 48 hour culturing on pyruvate Postgate’s medium supplemented with 1.5 mg/dm3 of the iron source (human hemoglobin and transferrin, bovine hemoglobin, transferrin, lactoferrin and hemin, equine myoglobin and cytochrome c). The control cells were cultured on medium devoid of iron. Most of the tested strains D. desulfuricans (except for DV/B) utilized iron from a wide variety host sources. The interstrain diversity of bacterial growth in the presence of each of iron sources was observed. Soil strain DSM 642 was the slowest proliferating one on medium containing both human and bovine transferrin. Therefore, this strain does not utilize iron from both iron sources. The most intensive growth was observed with DV/I and DV/I/1 intestinal strains on medium supplemented with equine myoglobin and cytochrome c, and bovine lactoferrin, whereas DV/H strain proliferated the most on medium containing both human and bovine hemoglobin.

PL

Patogenność bakterii Gram-ujemnych jest uwarunkowana ich zdolnością pozyskiwania żelaza ze środowiska oraz rezerw zainfekowanego makroorganizmu. W tym celu bakterie syntetyzują siderofory, czyli układy chelatujące żelazo, które umożliwiają im wykorzystywanie jego hemowych i niehemowych źródeł ustrojowych, takich jak hemoglobina, mioglobina, ferrytyna, transferyna i laktoferyna. Dotychczas nie poznano ustrojowych źródeł żelaza wykorzystywanych przez bakterie Desulfovibrio desulfuricans (D. desulfuricans). Gatunek ten kolonizuje m.in. przewód pokarmowy człowieka, stanowiąc składnik fi zjologicznej mikrofl ory jelita. Nie wyklucza się jednak udziału tych bakterii w etiopatogenezie niektórych schorzeń tego narządu, takich jak choroba Crohna czy wrzodziejące zapalenie jelita grubego. Celem podjętych badań była analiza możliwości wykorzystywania przez bakterie D. desulfuricans różnych ustrojowych źródeł żelaza. Zamierzenie to realizowano oceniając po 48 godzinach hodowli liczbę kolonii wygłodzonych izolatów D. desulfuricans na pirogronianowej pożywce Postgate’a wzbogaconej o 1,5 mg/dm3 określonego źródła żelaza (hemoglobiny i transferyny ludzkiej, hemoglobiny, transferyny, laktoferyny i heminy bydlęcej, mioglobiny i cytochromu c końskiego). Hodowlę kontrolną stanowiły bakterie namnażane się na podłożu z obniżoną ilością żelaza. Większość izolatów D. desulfuricans (oprócz DV/B) pozyskiwała żelazo z różnych źródeł ustrojowych, przy czym stwierdzono ich międzyszczepowe zróżnicowanie wzrostu w obecności każdej z żelazoprotein i heminy. Najwolniej namnażał się glebowy izolat DSM 642 na podłożu zawierającym transferynę ludzką i bydlęcą, nie wykorzystując żelaza zawartego w tym ustrojowym źródle. Wśród wszystkich badanych bakterii najintensywniej namnażały się dzikie szczepy DV/I i DV/I/1 na podłożach z końską mioglobiną i cytochromem c oraz laktoferyną bydlęcą oraz DV/H w obecności ludzkiej i bydlęcej hemoglobiny.

7

The induction of cytotoxicity by pterostilbene in various human cancer cell lines

71%

Wawszczyk J., Jesse K., Szewerniak A., Kapral M., Węglarz L.

Acta Poloniae Pharmaceutica - Drug Research

|

2018

|

vol. 75

|

issue 5

1161-1166

8

Changes in the cellular behaviour of human colonic cell line Caco-2 in response to butyrate treatment.

71%

Dzierżewicz Z., Orchel A., Węglarz L., Latocha M., Wilczok T.

|

2002

|

vol. 49

|

issue 1

211-220

EN

Gut-derived adenocarcinoma Caco-2 cells were treated with sodium butyrate (NaB) at physiologically relevant concentrations. We characterized its effects on proliferation, differentiation, apoptosis, adhesion to the solid support and interleukin-8 secretion. Differentiation was determined by brush border alkaline phosphatase activity. Apoptosis was assessed by acridine orange and Hoechst stains. Differentiation and apoptosis were analyzed in both adherent and floating cell populations. The transformed Caco-2 cells did not retain their malignant phenotype in the presence of NaB. They appeared to undergo a change in the phenotype induced by NaB, as indicated by reduced proliferation, enhanced differentiation, stimulation of apoptosis leading to decreased viability of cells, and stimulation of interleukin-8 secretion. Considering all the above facts and data, we postulate that Caco-2 cells cultured in NaB supplemented medium could regain the phenotypic characteristics of the phenotype of the parent cell from which originated the Caco-2 line.

9

Quantitative analysis of the level of p53 and p21WAF1 mRNA in human colon cancer HT-29 cells treated with inositol hexaphosphate

71%

Węglarz L., Molin I., Orchel A., Parfiniewicz B., Dzierżewicz Z.

|

2006

|

vol. 53

|

issue 2

349-356

EN

The aim of this study was to analyze the molecular mechanism of inositol hexaphosphate (InsP6) action through which it may inhibit proliferation of colon cancer cells and cell cycle progression. A kinetic study of p53 and p21WAF1 mRNA increase was performed on human colon cancer HT-29 cells after treatment with 1, 5 and 10 mM InsP6 for 6, 12, 24 and 48 h. Real-time-QPCR based on TaqMan methodology was applied to analyze quantitatively the transcript levels of these genes. The transcription of β-actin and GAPDH genes was assessed in parallel to select the control gene with least variability. The 2-ΔΔCt method was used to analyze the relative changes in gene transcription. InsP6 stimulated p53 and p21WAF1 expression at the mRNA level, with the highest increase in p21WAF1 mRNA occurring at 24 h, i.e., following the highest increase in p53 mRNA observed at 12 h. Based on these studies it may be concluded that the ability of InsP6 to arrest the cell cycle may be mediated by the transcriptional up-regulation of the p53-responsive p21WAF1 gene.

Refine search results

Aspiryna – 115 lat po odkryciu

Molekularne metody stosowane w diagnostyce zespołu long-QT

Ocena sekrecji IL-6 przez komórki nowotworowe jelita grubego traktowane kwasem fitynowym

Polimorfi zm genetyczny wybranych alleli cytochromu CYP2D6 u pacjentów z kardiomiopatią rozstrzeniową i zapaleniem mięśnia sercowego

Ochronny wpływ kwasu fitynowego na peroksydację kwasu linolowego w warunkach in vitro

Wykorzystywanie ustrojowych źródeł żelaza przez bakterie Desulfovibrio desulfuricans

The induction of cytotoxicity by pterostilbene in various human cancer cell lines

Changes in the cellular behaviour of human colonic cell line Caco-2 in response to butyrate treatment.

Quantitative analysis of the level of p53 and p21WAF1 mRNA in human colon cancer HT-29 cells treated with inositol hexaphosphate