PL
Enzymy restrykcyjne ze względu na istotę swojego działania mogą być źródłem informacji
na temat miejsca lub specyficzności sekwencyjnej wiązania substancji do DNA. Z drugiej
strony, działanie enzymów może być zaburzone przez związki mające zdolność do metylacji
zasad DNA. Cecha ta może być wykorzystywana do pierwotnej selekcji związków potencjalnie
genotoksycznych. W pracy badano działanie enzymu restrykcyjnego £coRI na DNA, które
było uprzednio inkubowane ze związkami fosforoorganicznymi. DNA plazmidu pUC19
0 stężeniu 78 μg/ml był inkubowany przez 72 h z insektycydami fosforoorganicznymi
parationem i metyloparationem oraz z ich głównymi metabolitami, odpowiednio paraoksonem
1 metyloparaoksonem o stężeniu 300 μM. Po inkubacji nie związane insektycydy były usuwane
przez ultrafiltrację, a DNA poddawano 1 h inkubacji z endonukleazą restrykcyjną EcoRI
i analizowano przez elektroforezę w 0.8% żelu agarozowym. Związek fosforoorganiczny
metyloparaokson powodowa! rozwinięcie superskręconego DNA plazmidu pUC19, a działanie
EcoRI na ten DNA było zaburzone, co znalazło swe odbicie w zmienionym obrazie elektroforetycznym.